¿Por qué utilizar la PCR para detectar enfermedades de los caballos?

Las pruebas de diagnóstico molecular que utilizan PCR (reacción en cadena de la polimerasa) han revolucionado la forma en que veterinarios, investigadores, zoológicos, instalaciones de cuidado de animales y establos mantienen la salud animal y obtienen datos sobre enfermedades.

La sensibilidad, especificidad y rapidez con la que se identifican patógenos y mutaciones mediante PCR permiten posibilidades de diagnóstico, investigación y seguimiento que no están disponibles con otras técnicas.

Las técnicas moleculares representan una herramienta extraordinariamente eficaz para el diagnóstico de enfermedades en poblaciones valiosas de caballos y otros animales.

En las pruebas de PCR, el ácido nucleico (ADN o ARN) se aísla de una muestra y luego se amplifica (después de un paso de transcripción inversa adicional en el caso del ARN) utilizando cebadores altamente específicos complementarios a las secuencias diana conocidas. Los controles positivos y negativos se ejecutan simultáneamente; los controles internos monitorean la extracción y la eficiencia de la PCR. Cada muestra se procesa en alícuotas duplicadas para verificar la repetibilidad. La amplificación se visualiza y registra utilizando protocolos e instrumentación de última generación .

¿Cuándo se deben recolectar las muestras?

Muchos patógenos se eliminan de forma intermitente. Por lo tanto, para las pruebas ante mortem, generalmente es mejor recolectarmuestras cuando un animal presenta síntomas. A menudo, los títulos de patógenos aumentan al principio de un episodio de síntomas, por lo que, idealmente, las muestras deben recolectarse al principio de un episodio de síntomas y cuando los síntomas son peores. Es posible que los tratamientos reduzcan los síntomas y eliminen temporalmente la infección, pero no eliminen por completo la infección. Si se administró tratamiento, por lo general, debe esperar al menos una semana después del tratamiento y / o hasta que los síntomas regresen, antes de recolectar una muestra para la prueba.

¿En qué se complementan las pruebas moleculares basadas en PCR con otros tipos de pruebas?

La reactividad cruzada reduce la especificidad de muchas pruebas serológicas: un resultado positivo puede ser causado por organismos distintos del objetivo. Los ensayos moleculares, por otro lado, son muy específicos porque detectan la secuencia genética única del patógeno diana. Incluso se pueden distinguir cepas de patógenos estrechamente relacionadas.

La influencia de algunas fuentes de falsos positivos se reduce en las pruebas moleculares, porque mientras que otros métodos de prueba detectan anticuerpos contra patógenos que pueden no estar todavía presentes, los análisis moleculares detectan el material genético del patógeno en sí, una indicación directa de la presencia del patógeno. en la muestra.

Las infecciones a menudo se pueden identificar mediante PCR muy temprano en un episodio de síntomas. La detección no depende de niveles elevados de anticuerpos, que pueden tardar días o semanas en ocurrir .

Los animales con títulos altos de algunos virus en realidad pueden exhibir niveles de anticuerpos muy bajos, ya que su sistema inmunológico se ve afectado por una infección. Esto puede resultar en diagnósticos falsos negativos si se utilizan únicamente las pruebas de anticuerpos.

La exquisita sensibilidad de la PCR permite la detección de un patógeno diana en una muestra, incluso si está presente en títulos muy bajos, e incluso a partir de volúmenes de muestra muy pequeños.

Muchos tipos de muestras diferentes son apropiados para las pruebas de PCR, no solo el suero. Consulte nuestras hojas de datos de ensayo para conocer los requisitos de muestra de cualquier prueba.