Escherichia Coli 

Código de prueba: DIAG0016 

Detección cualitativa y diferenciación por PCR de cepas patógenas de E. coli en perros y gatos – ETEC, EHEC, EIEC, EPEC y EAEC

El tracto intestinal de la mayoría de los mamíferos, incluidos perros, gatos y humanos, está colonizado por la bacteria Escherichia coli. La mayoría de las cepas de E. coli que se encuentran en perros y gatos son flora intestinal normal y no patógena, pero algunas cepas pueden causar enfermedades del tracto urinario, del sistema nervioso central y especialmente del tracto gastrointestinal; el síntoma más frecuente es la diarrea. Estas cepas patógenas también pueden causar enfermedades similares en humanos en contacto cercano con mascotas infectadas.

Los síntomas inducidos por estas E. coli diarreogénicas pueden deberse a la producción de toxinas u otros rasgos de virulencia. Las cepas de E. coli que inducen diarrea en sus huéspedes se pueden dividir en cinco categorías principales sobre la base de distintas características epidemiológicas y clínicas y determinantes de virulencia específicos:

ETEC – E. coli enterotoxigénica : produce toxina termolábil (LT) y toxina termoestable (ST).

EHEC – E. coli enterohemorrágica : Produce toxinas similares a shiga (SLT) I y II.

EIEC: E. coli enteroinvasiva : por lo general, invade y destruye la mucosa intestinal.

EPEC – E. coli enteropatógena : daña la mucosa intestinal con lesiones de unión y borrado características mediadas por una proteína codificada por un gen llamado locus de unión y borrado (eal).

EAEC – E. coli enteroagregativa : la epidemiología y patogenicidad de estas cepas aún no se han definido claramente, pero la presencia de un plásmido grande de 60 kD que codifica varios factores de virulencia y toxinas es importante para su virulencia.

Clínicamente, ETEC induce una diarrea acuosa en huéspedes infectados por la acción de dos toxinas, LT y ST. La enterotoxina LT es muy similar a la toxina del cólera tanto en estructura como en modo de acción. Se sabe que ST se une y activa una enzima guanilato ciclasa ubicada en las membranas apicales de las células huésped. Esto conduce a la secreción de líquidos y electrolitos que resulta en una diarrea acuosa. El período de incubación es de aproximadamente 1-2 días y la enfermedad puede durar de 3 días a varias semanas.

Las ECEH están representadas principalmente por una sola cepa, el serotipo O157: H7, que causa un síndrome diarreico con abundante secreción sanguinolenta y sin fiebre. Existe un efecto tóxico en los riñones y la diarrea causada por esta cepa puede ser fatal, especialmente en los bebés, debido a la insuficiencia renal aguda. La infección en humanos a menudo se asocia con la ingestión de carne de hamburguesa mal cocida. El período de incubación es de aproximadamente 3 a 4 días y la duración de la enfermedad es de aproximadamente 1 semana.

Los EIEC son similares a Shigella en su mecanismo patogénico y síntomas clínicos. Las bacterias EIEC penetran y se multiplican dentro de las células epiteliales del colon provocando una destrucción celular generalizada. El síndrome clínico es idéntico a la disentería por Shigella e incluye una diarrea similar a la disentería con fiebre. EIEC no produce toxina LT o ST y, a diferencia de Shigella, no produce toxina shiga. El período de incubación es inferior a 24 horas.

EPEC causa una diarrea acuosa similar a ETEC, pero no produce toxinas ST o LT. Estas cepas son una de las principales causas de diarrea infantil en los países en desarrollo. La enfermedad suele durar de 1 a 3 días.

Los EAEC se adhieren a las células epiteliales en un patrón característico de ladrillos apilados conocido como patrón de adherencia agregativa (AA). Cuando se adhieren a las superficies mucosas del intestino delgado y grueso, estimulan la producción de moco, lo que da lugar a una biopelícula espesa que contiene moco incrustada con EAEC. También pueden secretar toxinas, como la enterotoxina 1 termoestable (EAST1), Pet y Pic, que están asociadas con daños en la mucosa. Los EAEC fueron reconocidos originalmente como uno de los agentes etiológicos predominantes de la diarrea persistente en los países en desarrollo y siguen siendo una causa importante de diarrea aguda y prolongada en muchas partes del mundo, incluidos los países industrializados.

Se encuentran disponibles varios ensayos para la detección de E. coli diarreogénica , que incluyen reacciones bioquímicas, serotipificación y ensayos fenotípicos basados ​​en las características de virulencia. Sin embargo, la detección molecular por PCR se ha convertido en un método comúnmente utilizado para detectar e identificar estas bacterias porque el método da resultados rápidos y confiables además de su alta sensibilidad y especificidad (Bellin et al., 2001; Stacy-Phipps et al., 1995).

Utilidades:

• Ayudar a confirmar el agente causante de la enfermedad.
• Selección del régimen de tratamiento adecuado
• Acortar el tiempo necesario para confirmar un diagnóstico clínico
• Ayude a garantizar que las perreras y los criaderos estén libres de E. coli diarreogénica
• Prevención temprana de la propagación de E. coli diarreogénica
• Minimizar la exposición del personal a la E. coli diarreogénica.
• Seguimiento de la seguridad de productos biológicos derivados de especies animales susceptibles

Referencias:

Bellin, T., Pulz, M., Matussek, A., Hempen, HG y Gunzer, F. (2001) Detección rápida de Escherichia coli enterohemorrágica mediante PCR en tiempo real con sondas de hibridación fluorescentes. J. Clin. Microbiol. 39: 370-374.

Stacy-Phipps, S., Mecca, JJ y Weiss, JB (1995) El ensayo de PCR multiplex y el método de preparación simple para muestras de heces detectan el ADN enterotoxigénico de Escherichia coli durante el curso de la infección. J. Clin. Microbiol. 33: 1054-1059.

Requisitos de la muestra: 0,5 ml de heces, o hisopo rectos, o 0,2 ml de cultivo bacteriano.

Comuníquese con DIAGNOGEN si necesita asesoramiento para determinar un tipo de muestra apropiado para una aplicación de diagnóstico específica. Para los tipos de muestras que no se enumeran aquí, comuníquese con  DIAGNOGEN para confirmar la aceptabilidad de la muestra y las instrucciones de envío.

Para todos los tipos de muestras, si habrá un retraso en el envío o durante un clima muy cálido, refrigere las muestras hasta que se envíen y envíelas con una compresa fría, a menos que se especifiquen requisitos de envío más estrictos. Las muestras congeladas deben enviarse de modo que permanezcan congeladas durante el transporte. Consulte las instrucciones de envío para obtener más información.

Tiempo de respuesta: 3 días hábiles.

Metodología: PCR cualitativa

Rango normal: no detectado